人绒毛膜促性腺激素抗体(HCG-IgG)ELISA试剂盒

? ?产品货号:BC8K7141H

? ?产品规格:48T/96T

? ?适用范围:本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断,适用于人血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清及其它生物体液。

? ?检测原理:试剂盒采用双抗原夹心法原理:将捕获抗原包被于酶标板上,加入样品,样品中的抗体被捕获,结合形成“抗原-抗体”免疫复合物,清洗去除游离的杂质,再加入HRP标记的酶标记的检测抗原,形成“抗原-抗体-酶标抗原”夹心复合物,清洗去除多余的杂质,加入TMB显色,再加入终止液,用酶标仪在450nm处测OD值,颜色的深浅和样品中的待测抗原浓度呈正比。

? ?需要但未包含的实验材料

? ?·蒸馏水或去离子水,一次性离心管、一次性手套等耗材;

? ?·移液器、多通道移液器及配套枪头;

? ?·烧杯、量筒、试剂瓶等容器具;

? ?·用于封贴微孔板的封板膜或其他替代材料;

? ?·微孔板振荡器(如有需要)、离心机、旋涡振荡器等辅助设备;

? ?·恒温培养箱、恒温水浴箱、酶标仪、洗板机。

? ?试剂的准备及储存

? ?·试剂盒各组分应储存于2~8°C保存;

? ?·使用前请确保试剂盒按规定的条件储存,每次实验仅准备所需实验用量的试剂;

? ?·1X洗液的配制:浓缩洗液(20×)如有晶体析出,需在37°C下加热至晶体全部溶解后使用。用蒸馏水1:20稀释,例如:10mL浓缩洗涤液加入190mL的蒸馏水,混合均匀。配制好的洗液可以在室温保存1周;

? ?样品采集、预处理及储存

? ?下面列出的样品收集和储存条件旨在作为一般性指导,不同类型样品的储存、使用稳定性尚未完全评估。

? ?·血清:使用血清采集管采集全血,室温静置待血细胞凝集后取的血清,或直接在1000×g下离心15分钟取得血清。操作应柔和,避免溶血发生。获取的血清应及时进行检测,如不能及时进行检测,应等分为多份,储存在-20℃及以下温度条件,储存时间不超过6个月,

? ?冷冻储存血清样品冻融不超过2次。

? ?·血浆:使用EDTA或肝素采血管收集血浆。全血采集后以1000×g离心15分钟取得血浆。操作应柔和,避免溶血发生。获取的血浆应及时进行检测,如不能及时进行检测,应等分为多份,储存在-20°℃C及以下温度条件,储存时间不超过6个月,冷冻储存血浆样品冻融不超过2次。

·不能检测含叠氮钠、悬浮纤维蛋白或聚集物、重度溶血样品。

·样品应无微生物污染。

? ?实验步骤

? ?使用前将所有试剂置于室温平衡30分钟左右,也可置于37℃C温箱快速回温至室温。注意:酶标板未恢复室温前,请勿开封。

? ?1、合理安排阳性对照孔、阴性对照孔、样品孔。

? ?2、阳性对照孔加入阳性对照100uL,阴性对照孔加入阴性对照100uL。阴阳对照各设置2孔。

? ?3、样本孔先加入样品稀释液80uL,再加入样本20uL。

? ?4、盖上封板膜,在37°C下孵育30分钟。

? ?5、洗板5次,最后一次洗板后弃去残留洗液,倒扣酶标板,在干净的吸水纸上拍干。

? ?6、每孔加入酶结合物工作液100μL。

? ?7、盖上封板膜,在37°C下孵育30分钟。

? ?8、洗板5次,最后一次洗板后弃去残留洗液,倒扣酶标板,在干净的吸水纸上拍干。

? ?9、每孔加入显色剂100uL。

? ?10、37°C下避光孵育15**分钟。

? ?11、每孔加入终止液50μL。

? ?12、使用酶标仪在450nm检测波长及620~690nm参比波长条件下测定吸光度值,如果没有参比波长则仅选择450nm波长进行检测。如果最高浓度校准品OD值过高,应立即在405/630nm双波长条件下检测。

? ?阳性判断值Cut-Off

? ?Cut-Off=阴性对照孔平均OD值X2.1(阴性对照孔OD均值小于0.050时,按0.050计算)。

? ?例:阴性对照孔平均OD值为0.100,则Cut-OFF值=0.100X2.1=0.210;阴性对照孔平均OD值为0.020,则Cut-OFF值=0.050X2.1=0.105。

? ?结果判断

? ?阳性结果:样本OD值>Cut-OFF值,结果判为阳性;

? ?阴性结果:样本OD值
? ?检测的局限性

? ?样本浓度低于检出限时,检测结果无法进行准确判断。本试剂为定性试剂,不能作为定量试剂使用。

? ?产品性能指标

? ?以下结果基于校准品的浓度值实验得出,未纳入基质效应等其他因素的潜在影响。检测3份企业阳性参考品,结果均为阳性。检测3份企业阴性参考品,结果均为阴性。

? ?精密度:板内精密度CV<10%(N=20),板间精密度CV<15%(N=20)。

? ?特异性(Analyticalspecificity):其他相关因子在稀释缓冲液中制备为1Oμg/mL测定,没有观察到明显的交叉反应。

特别提示:仅供科研使用,不得用于临床检验及治疗使用 ,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!

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