NCI-H2347细胞(非小细胞肺癌细胞)

一、细胞基本属性


细胞名称

NCI-H2347细胞(非小细胞肺癌细胞)


细胞别称

H2347; H-2347; NCIH2347


商品货号

LM8C1102


种属来源

人


年龄性别

女;54岁


组织来源

肺腺


生长特性

贴壁生长


细胞形态

上皮细胞样


背景简介

该系于1990年5月从肺腺癌中建立。


生物安全等级

1


细胞规格

1×106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装


支原体检测

无


基因表达情况





保藏机构

ATCC; CRL-5942


培养基

RPMI1640+10%FBS


培养条件

气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃


冻存条件

无血清冻存液,液氮储存


倍增时间





STR鉴定位点

Amelogenin X;CSF1PO 11;D2S1338 17,19;D3S1358 16;D5S818 11;D7S820 10,11;D8S1179 10,13;D13S317 12,14;D16S539 11;D18S51 12,19;D19S433 13,15;D21S11 31,31.2;FGA 20,25;PentaD 12;PentaE 8,19;TH01 9.300000000000001;TPOX 8;vWA 16,19;D6S1043 14;D12S391 19,20;D2S441 11,15;

二、细胞培养操作

1)?复苏细胞:以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主。

将含有?1mL 细胞悬液的冻存管在?37℃水浴中迅速摇晃解冻,加?入?4mL 培养基混合均?匀。在?1000RPM 条件下离心?4 分钟,弃去上清液,补?加?1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培?养过夜(或将?细胞悬液加入?10cm 皿中,加入约?8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并?检查细胞密度。

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2) 细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。

a、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的?PBS 润洗细胞?1-2 次。

b、加?1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于?37℃培?养箱中消化?1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分?变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养?瓶后加少量培养基终止消?化。??

c、按?6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在?1000RPM 条件下离心?4 分?钟,弃去上清液,补加?1-2mL 培养液后吹匀。

d、将细胞悬液按?1:2 比例分到新的含?8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

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3)?细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例;

a、收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。

b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5×106~1×107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。

c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

三、培养注意事项?

1.?收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象?发生请及时和我们联系。?

2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需?细胞因子等,确保细胞培养条件一致,若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题,责任由?客户自行承担。?

3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分细胞由于温度?变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常现象。观察好细胞状态后,75%酒精消毒瓶壁将 T25 瓶置于 37℃培养箱放置 2-4h。?

4.?贴壁细胞可以消化,悬浮细胞直接混匀收集细胞,900 rpm-1000 rpm?离心 3 min,弃上?清。加 5?mL?PBS?重悬细胞,再 900 rpm-1000 rpm?离心 3 min,,用新鲜的完全培养基重悬?细胞,并接种到新的培养瓶或培养皿中,置于培养箱中进行培养。?

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。?

6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和我司技术部沟通?交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,告知细胞?的具体情况,以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。?

7. 该细胞仅供科研使用。?

8. 备注:运输用的培养基 (灌液培养基) 不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培 养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 ????收到细胞后第一次传代建议 1:2 传代 。?

9. 注意: ?1:2 传代就是 1 个 T25 瓶传 2 个 T25 瓶或者 2 个 6cm 皿。不是 1 个 T25 瓶传 2 个10cm 皿。

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