NP-69 SV40T细胞(人鼻咽黏膜上皮细胞)

一、细胞基本属性




细胞名称



NP-69 SV40T细胞(人鼻咽黏膜上皮细胞)




细胞别称



NP69SV40T;?NP-69




细胞货号



LM8C1405




种属来源



鼻咽;?SV40转化;男性




生长特性



贴壁细胞




细胞形态



上皮细胞样




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背景简介



NP69细胞来源于用含有SV40大T抗原的PX8质粒转染的活检分离的原代鼻咽上皮细?胞的P1代培养物。?NP69细胞保留了正常鼻咽细胞的许多特征?,包括角蛋白谱和对???TGF-?β的反应?,?同时具有在NPC中观察到的许多遗传特征。?NP69细胞是非致瘤性????的?,并且表现出贴壁依赖性生长。?NP69细胞对于研究病毒相关肿瘤发生的机制特????别有用。




生物安全等级



1




细胞规格



1?×?106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装




支原体检测



无




培养基



T25瓶10-12ml?;?10cm皿12-15ml




培养条件



空气?,95%?;?二氧化碳?(CO2)?,?5%




冻存液配方



92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐);




冻存规格



200-300万/ml?,?1ml每管




倍增时间



~12-30小时




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冻存方法



1.消化并离心获得细胞沉淀后?,加配置好的冻存液轻轻重悬细胞;

2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管;

3.将冻存管转入程序冻存盒?,放入-80度冰箱过夜?,第二天转入液氮保存;没有程序?冻存盒的实验室?,加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min?,再-20??度静置2h后转入-80度过夜?,第二天转入液氮保存




换液周期



2~3天




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传代方法



1.尽量吸干净T25瓶原培养基;

2.加3-4ml?常温PBS轻轻润洗细胞10-20s?,吸走润洗的PBS;

3.T25瓶加1ml左右胰酶?,轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层;?4.将培养瓶放入37度培养箱消化;

5.消化到细胞间隙变大?,但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化;?6.混匀细胞?,900rpm离心3-5min?,弃上清;




7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞?,均匀分到新的培养瓶里;

8.补足完全培养基?,将培养瓶放回培养箱静置培养;





H-2d




注意事项



冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性?,若有异常?,及时调整实验方?案




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