22RV1细胞(前 列 腺 癌细胞STR鉴定正确)

一、细胞基本属性
细胞名称 22RV1细胞(前 列 腺 癌细胞STR鉴定正确)
细胞别称 22RV1; 22Rv-1; 22rV1; CWR22-Rv1; CWR22R-V1; CWR22-R1; CWR22Rv1; CWR22R;人前列腺 癌细胞
商品货号 BC8C0004
种属来源 人
年龄性别 男
组织来源 前列腺
生长特性 贴壁生长
细胞形态 上皮细胞样
背景简介 前列 腺 癌细胞,该细胞能产生逆转录病 毒需要在生物安全等级2级的实验室环境中操作细胞。22RV1细胞表达前列腺特异抗原PSA。二羟基睾丸脂酮可轻微刺激细胞生长,经western blot检测溶解产物与雄激素受体抗体起免疫反应。EGF可刺激细胞生长,但TGβ-1不能抑制细胞生长。近期证实22RV1可生产高滴度的人逆转录病 毒XMRV。在裸鼠体内可成瘤。
生物安全等级 2
细胞规格 1×106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装
支原体检测 无
基因表达情况

保藏机构 ATCC; CRL-2505 BCRC; 60545 DSMZ; ACC-438
培养基 90%DMEM+10% FBS+PS
培养条件 气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃
冻存条件 无血清冻存液,液氮储存
倍增时间 ~40 hours
STR鉴定位点 Amelogenin: X,Y CSF1PO: 10,11 D13S317: 9,12 D16S539: 12 D5S818: 11,12,13 D7S820: 9,10,11 TH01: 6,9.3 TPOX: 8 vWA: 15,21

?二、细胞培养操作?

1)?复苏细胞:将含有 1?mL?细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 4?mL?培养基混?合均匀。在 1000?rpm?条件下离心 3?min,弃去上清液,加 1-2?mL?培养基后吹匀。然后将所有?细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜 (或将细胞悬液加入 6?cm?皿中,加入约 4?mL?培养基,培养过夜) 。第三天换液并检查细胞密度。?

2)?细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。?

a、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.02%EDTA)于培养瓶中,使消化液浸润所有细胞,将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-2 min(视细胞情况而定),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加2-3ml完全培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中,1000 rpm离心5 min,弃去上清液,补加1-2 mL培养液后吹匀。??????????

c、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中,置于培养箱中培养。?

3)?细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面?T25 瓶为例;

a、收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000?rpm?条件下离心 4?min,弃去上清液,?用?PBS?清洗一遍,弃尽 PBS,进行细胞计数。

b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度 5×106~1×107/mL,轻轻混匀,每支冻?存管冻存?1mL?细胞悬液,注意冻存管做好标识。

c、将冻存管放入-80℃冰箱,24?h?后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。?

三、培养注意事项

1、收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象 发生请及时和我们联系。??

2、仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需 细胞因子等,确保细胞培养条件一致,若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题,责任由 客户自行承担。??


3、用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分细胞由于温度 变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常现象。观察好细胞状态后,75%酒精消毒瓶壁将 T25 瓶置于 37℃培养箱放置 2-4h。??


4、贴壁细胞可以消化,悬浮细胞直接混匀收集细胞,900 rpm-1000 rpm 离心 3 min,弃上 清。加 5 mL PBS 重悬细胞,再 900 rpm-1000 rpm 离心 3 min,,用新鲜的完全培养基重悬 细胞,并接种到新的培养瓶或培养皿中,置于培养箱中进行培养。??


5、请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。??


6、建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和我司技术部沟通 交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,告知细胞 的具体情况,以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。??


7、该细胞仅供科研使用。?


8、备注:运输用的培养基 (灌液培养基) 不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培 养条件新配制的完全培养基来培养细胞。? 收到细胞后第 一次传代建议 1:2 传代 。???

9、注意:1:2 传代就是 1 个 T25 瓶传 2 个 T25 瓶或者 2 个 6cm 皿。不是 1 个 T25 瓶传 2 个10cm 皿。

关键字: 22RV1;人前列腺癌细胞;