检测原理:
博研因赛生物生产的ELISA试剂盒采用抗体夹心法:将抗人C-CKR-8抗体包被于酶标板上,标本和标准品中的人C-CKR-8与抗体结合,加入生物素化的抗人C-CKR-8抗体,再加入ABC复合物与生物素抗体结合,形成免疫复合物,然后加入TMB显色底物,显色剂显蓝色,最 后加终止液变黄色,游离的成分被洗去。在450 nm处测OD值,人C-CKR-8浓度与OD值之间呈正比,可通过绘制标准曲线计算出标本中C-CKR-8的浓度。

ELISA试剂盒组成成分:

检测程序:

1、微孔板使用前洗板2次,向滤纸印干后,请立即使用。

2、加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板混匀后置37℃,90分钟,然后甩去酶标板内液体,向滤纸上印干,不洗板。

3、每孔加入1×的生物素化抗体工作液100ul,混匀后置37℃,60分钟。

4、洗板:用洗涤液将微孔板充分洗涤3次,向滤纸上印干。

5、每孔加入1×的ABC复合物工作液100ul,混匀后置37℃,30分钟。

6、洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤5次,向滤纸上印干。

7、每孔加入底物工作液90ul,混匀后置37?℃暗处反应3-20分钟(具体显色时间根据显色结果而定)。

8、每孔加入50ul终止液,混匀,30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。


注意事项:

1、在试验中标准品和样本检测时建议作双孔检测,每次检测都应做标准曲线。

2、洗涤过程很关键,洗涤不充分将导致 精 确度误差及OD值错误地升高,从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能 有结晶,属于正常现象,37℃水浴使结晶完全溶解后再配制洗涤液。

3、检测时所有试剂都要恢复到室温,板条开封后剩余板条需封好,放回袋中2?个月内用完。

4、试剂盒使用超敏TMB溶液,若显色过深会出现絮状物,属正常现象,不影响结果判读。

5、仅用于科研,不能用于临床诊断!

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