Human BDNF(Brain Derived Neurotrophic Factor) ELISA Kit
产品概述
人BDNF ELISA试剂盒是一种用于体外定量检测人血清、血浆、细胞培养上清液、组织匀浆、脑脊液及其他生物液体中 BDNF（脑源性神经营养因子） 浓度的免疫学检测工具。BDNF是神经科学和精神疾病研究中最核心的生物标志物之一。
靶标蛋白：BDNF
检测原理
采用 双抗体夹心法（Sandwich ELISA）：
- 包被：酶标板预包被抗人BDNF捕获抗体（单克隆）
- 结合：样本中BDNF与包被抗体结合
- 检测：加入生物素化抗BDNF检测抗体 → 加入HRP-链霉亲和素（SABC）
- 显色：加入TMB底物，HRP催化蓝色 → 加终止液转黄色
- 读数：450 nm测OD值，OD值与BDNF浓度呈正比
- 定量：通过四参数逻辑（4-PL）标准曲线计算样本浓度
别名:BDNF(Brain Derived Neurotrophic Factor)/ANON2/BULN2/Abrineurin/neurotrophin？
检测程序:
1、微孔板使用前洗板2次,向滤纸印干后,请立即使用。
2、加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板混匀后置37℃,90分钟,然后甩去酶标板内液体,向滤纸上印干,不洗板。
3、每孔加入1×的生物素化抗体工作液100ul,混匀后置37℃,60分钟。
4、洗板:用洗涤液将微孔板充分洗涤3次,向滤纸上印干。
5、每孔加入1×的ABC复合物工作液100ul,混匀后置37℃,30分钟。
6、洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤5次,向滤纸上印干。
7、每孔加入底物工作液90ul,混匀后置37?℃暗处反应3-20分钟(具体显色时间根据显色结果而定)。
8、每孔加入50ul终止液,混匀,30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。
结果判断与计算:
1、所有OD值建议减除空白值后再行计算,如空白OD低于0.1,也可以直接计算。
2、以标准品浓度作横坐标,OD值作纵坐标,手工绘制或用软件绘制标准曲线,根据样品OD值计算出相应含量,再乘上稀释倍数即可。
注意事项:
1、在试验中标准品和样本检测时建议作双孔检测,每次检测都应做标准曲线。
2、洗涤过程很关键,洗涤不充分将导致 度误差及OD值错误地升高,从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能 有结晶,属于正常现象,37℃水浴使结晶完全溶解后再配制洗涤液。
3、检测时所有试剂都要恢复到室温,板条开封后剩余板条需封好,放回袋中2?个月内用完。
4、试剂盒使用超敏TMB溶液,若显色过深会出现絮状物,属正常现象,不影响结果判读。
仅用于科研,不能用于临床诊断!
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