Human CLIP(Corticotropin Like Intermediate Lobe Peptide) ELISA Kit

人CLIP(皮质激素类中间洛贝肽)ELISA试剂盒

标准操作流程双抗体夹心法

1. 加样 → 37℃温育60 min（快速版30 min）
2. 洗板 × 5次（每孔350 μL，浸泡1–2 min）
3. 加生物素化检测抗体 → 37℃温育60 min
4. 洗板 × 5次
5. 加HRP-亲和素（SABC/ABC） → 37℃温育30 min
6. 洗板 × 5次
7. 加TMB显色 → 37℃避光10–20 min
8. 加终止液（2N H₂SO₄） → 15 min内450 nm读OD值
9. 标准曲线计算样品浓度（OD值×稀释倍数）

别名:CLIP/Restin/Reed-Sternberg intermediate filament-associated protein/Cytoplasmic linker protein 1/Cytoplasmic linker protein 170 alpha-2(CLIP-170)/CYLN1/RSN

1、微孔板使用前洗板2次,向滤纸印干后,请立即使用。

2、加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板混匀后置37℃,90分钟,然后甩去酶标板内液体,向滤纸上印干,不洗板。

3、每孔加入1×的生物素化抗体工作液100ul,混匀后置37℃,60分钟。

4、洗板:用洗涤液将微孔板充分洗涤3次,向滤纸上印干。

5、每孔加入1×的ABC复合物工作液100ul,混匀后置37℃,30分钟。

6、洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤5次,向滤纸上印干。

7、每孔加入底物工作液90ul,混匀后置37?℃暗处反应3-20分钟(具体显色时间根据显色结果而定)。

8、每孔加入50ul终止液,混匀,30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。

结果判断与计算:

1、所有OD值建议减除空白值后再行计算,如空白OD低于0.1,也可以直接计算。

2、以标准品浓度作横坐标,OD值作纵坐标,手工绘制或用软件绘制标准曲线,根据样品OD值计算出相应含量,再乘上稀释倍数即可。

注意事项:

1、在试验中标准品和样本检测时建议作双孔检测,每次检测都应做标准曲线。

2、洗涤过程很关键,洗涤不充分将导致 度误差及OD值错误地升高,从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能 有结晶,属于正常现象,37℃水浴使结晶完全溶解后再配制洗涤液。

3、检测时所有试剂都要恢复到室温,板条开封后剩余板条需封好,放回袋中2?个月内用完。

4、试剂盒使用超敏TMB溶液,若显色过深会出现絮状物,属正常现象,不影响结果判读。

5、仅用于科研,不能用于临床诊断!

关键字: CLIP;皮质激素类中间洛贝肽;CLIP ELISA Kit;人CLIP ELISA试剂盒;