Human CK-18/KRT18(Cytokeratin 18) ELISA Kit

人CK-18/KRT18(细胞角蛋白18)ELISA试剂盒

检测范围:0.156-10ng/ml

灵敏度:0.094ng/ml

别名:KRT18/CK-18/Cytokeratin 18/Keratin, type I cytoskeletal 18/Keratin-18/K18/Cell proliferation-inducing gene 46 protein/Cytokeratin-18

参数与检测原理

• 检测原理：采用经典的双抗体夹心法。微孔板预包被了抗CK-18抗体，依次加入样本、HRP标记的检测抗体，形成复合物后加入TMB底物显色。颜色深浅与样本中CK-18浓度呈正比。
• 适用样本：血清、血浆、细胞培养上清或组织匀浆。

标准操作流程

1. 试剂平衡：试剂盒从2-8℃冷藏取出后，需在室温（20-25℃）平衡30分钟，防止冷凝水影响试剂活性。
2. 加样温育：
   • 设置标准品孔与样本孔，加入50-100μL样本或标准品。
   • 加入HRP标记的检测抗体（或生物素化抗体），封板膜封孔，37℃恒温孵育60-90分钟。
3. 洗涤与显色：
   • 弃去液体，使用洗涤缓冲液洗板3-5次，吸水纸拍干。
   • 加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15-30分钟。
4. 终止与读数：加入终止液（通常为稀硫酸），15分钟内使用酶标仪在450nm波长处测定OD值。

结果判断与计算:

1、所有OD值建议减除空白值后再行计算,如空白OD低于0.1,也可以直接计算。

2、以标准品浓度作横坐标,OD值作纵坐标,手工绘制或用软件绘制标准曲线,根据样品OD值计算出相应含量,再乘上稀释倍数即可。

注意事项:

1、在试验中标准品和样本检测时建议作双孔检测,每次检测都应做标准曲线。

2、洗涤过程很关键,洗涤不充分将导致 度误差及OD值错误地升高,从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能 有结晶,属于正常现象,37℃水浴使结晶完全溶解后再配制洗涤液。

3、检测时所有试剂都要恢复到室温,板条开封后剩余板条需封好,放回袋中2?个月内用完。

4、试剂盒使用超敏TMB溶液,若显色过深会出现絮状物,属正常现象,不影响结果判读。

5、仅用于科研,不能用于临床诊断!

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