Human CLDN11(Claudin 11) ELISA Kit

人CLDN11(Claudin11)ELISA试剂盒


别名:CLDN11/Oligodendrocyte-specific protein/CLDN11/claudin 11/OSP/OTM/Oligodendrocyte-specific protein/OSP/OTM

参数与检测原理

• 检测原理：采用经典的双抗体夹心法。微孔板预包被了特异性抗人CLDN11单克隆抗体，依次加入样本、HRP标记的检测抗体（或生物素化抗体及HRP标记的亲和素），形成复合物后加入TMB底物显色。颜色深浅与样本中CLDN11浓度呈正比。
• 检测范围：不同厂家规格存在差异，常见检测范围为 0.156 ng/mL – 10 ng/mL 或 0.313 ng/mL – 20 ng/mL，灵敏度通常在 0.065 ng/mL – 0.16 ng/mL 之间。
• 适用样本：血清、血浆（EDTA、肝素抗凝）、细胞培养上清或组织匀浆。

标准操作流程

1. 试剂平衡：试剂盒从2-8℃冷藏取出后，需在室温（20-25℃）平衡30分钟，防止冷凝水影响试剂活性。
2. 加样温育：
   • 设置空白孔、标准品孔与样本孔，精准加入100μL样本或标准品。
   • 加入HRP标记的检测抗体（或生物素化抗体），用封板膜封孔，37℃恒温孵育结合反应（通常为60-90分钟）。
3. 洗涤与显色：
   • 弃去液体，使用洗涤缓冲液洗板3-5次，吸水纸拍干， 去除未结合杂质。
   • 加入TMB底物液，37℃避光孵育10-30分钟，待梯度蓝色清晰显现。
4. 终止与读数：加入终止液（颜色由蓝转黄），10-30分钟内使用酶标仪在450nm波长处测定OD值，并根据标准曲线计算浓度。

结果判断与计算:

1、所有OD值建议减除空白值后再行计算,如空白OD低于0.1,也可以直接计算。

2、以标准品浓度作横坐标,OD值作纵坐标,手工绘制或用软件绘制标准曲线,根据样品OD值计算出相应含量,再乘上稀释倍数即可。

注意事项:

1、在试验中标准品和样本检测时建议作双孔检测,每次检测都应做标准曲线。

2、洗涤过程很关键,洗涤不充分将导致 度误差及OD值错误地升高,从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能 有结晶,属于正常现象,37℃水浴使结晶完全溶解后再配制洗涤液。

3、检测时所有试剂都要恢复到室温,板条开封后剩余板条需封好,放回袋中2?个月内用完。

4、试剂盒使用超敏TMB溶液,若显色过深会出现絮状物,属正常现象,不影响结果判读。

5、仅用于科研,不能用于临床诊断!

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