一、 检测原理

二、 试剂盒主要组分

• 预包被微孔板（如96孔或48孔）
• C1orf106标准品（冻干粉或液体，用于绘制标准曲线）
• 生物素标记检测抗体或酶标检测抗体（HRP）
• TMB显色底物及终止液（通常为2M H₂SO₄）
• 样本稀释液与浓缩洗涤液（使用前需按说明用蒸馏水稀释）
• 封板膜与说明书

三、 适用样本类型及处理

• 血清/血浆：离心去除沉淀后取上清。推荐使用EDTA或肝素抗凝血浆，避免使用严重溶血、高血脂或浑浊的样本。
• 细胞培养上清：1000×g离心20分钟去除细胞碎片，取上清检测。
• 组织匀浆：用预冷PBS冲洗组织并称重剪碎，按1:9比例加入PBS充分研磨或超声破碎，5000×g离心5-10分钟后取上清。
• 其他体液：无菌管收集后，2000-3000转/分离心20分钟，仔细收集上清。

四、 常规操作步骤

1. 准备与平衡：试剂盒从冷藏环境取出后，需在室温（20-25℃）平衡15-30分钟。未用完的板条应密封放回2-8℃保存。
2. 加样与孵育：设置标准品孔和样本孔。加入标准品或处理好的样本（如50μL或100μL），再加入检测抗体，用封板膜封住，37℃恒温箱温育（通常60分钟）。
3. 洗板：弃去孔内液体，在吸水纸上拍干。每孔加满洗涤液，静置1分钟后甩去并拍干，重复洗涤3-5次。
4. 显色：每孔加入TMB底物（或底物A、B各50μL），37℃避光孵育10-30分钟。
5. 终止与读数：加入终止液终止反应（孔内液体由蓝变黄）。在15分钟内使用酶标仪于450 nm波长处测定OD值（参考波长630 nm校正）。

五、 结果计算