丁香酚（EGN）ELISA试剂盒

检测原理

丁香酚（EGN）ELISA试剂盒采用间接竞争酶联免疫吸附法，其核心原理如下：

1. 抗原-抗体竞争结合：
   • 酶标板微孔中预包被丁香酚（EGN）的偶联抗原（EGN与载体蛋白结合的复合物）。
   • 样本中的游离EGN与预包被的偶联抗原竞争结合EGN特异性抗体（一抗）。
   • 游离EGN浓度越高，结合到固相抗原上的抗体越少。
2. 酶催化显色反应：
   • 加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的二抗，与已结合到固相抗原上的一抗结合，形成“包被抗原-一抗-酶标二抗”复合物。
   • 加入TMB底物，HRP催化TMB生成蓝色产物，加入终止液（稀硫酸）后，蓝色变为黄色。
   • 颜色深浅与样本中EGN浓度成反比：EGN浓度越高，竞争结合的抗体越少，显色越浅；反之则显色越深。
3. 定量分析：
   • 通过酶标仪测定450nm波长下的吸光度值（OD值），绘制标准曲线（以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标），计算样本中EGN的实际浓度。

四、关键注意事项

1. 样本处理：
   • 血清/血浆样本需离心后取上清，避免溶血和 高 血 脂 样本。
   • 组织匀浆需用PBS匀浆后离心取上清。
2. 操作规范：
   • 洗板需 ，避免残留液体影响结果。
   • 显色时间严格控制（通常10-15分钟），避免颜色过深或过浅。
   • 终止液加入顺序与显色液一致，保证反应同步终止。
3. 结果判定：
   • 若样本OD值高于标准曲线上限，需稀释后重新检测。
   • 所有结果以酶标仪读数为准，避免肉眼判断误差。
4. 储存条件：
   • 未开封试剂盒保存于2-8℃，开封后组分按说明书条件保存。
   • 酶标板开封后未用完，需装入密封袋，2个月内用完。                                                                                                           相关产品推荐

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