一、产品概述

• 英文名称：VCL ELISA Kit 或 Human Vinculin ELISA Kit
• 规格：常见规格有48T和96T两种，分别代表48孔和96孔的酶标板。
• 用途：仅供科研使用，不得用于临床诊断。

二、检测原理

该试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）进行检测。具体步骤如下：

1. 固相包被：微孔板上已预包被针对人纽蛋白（VCL）的特异性捕获抗体。
2. 抗原结合：向微孔中加入标准品或待测样本后，样本中的VCL抗原与固相抗体结合。
3. 酶标复合物形成：加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体，与已固定的抗原结合，形成“抗体-抗原-酶标抗体”夹心复合物。
4. 显色反应：加入底物TMB溶液，在HRP的催化下，TMB由无色变为蓝色。加入终止液（通常为硫酸溶液）后，使溶液颜色由蓝变黄。
5. 测定吸光度：使用酶标仪在450nm波长处测定吸光度（OD值）。样本中VCL的浓度与OD值呈正比。

三、主要组分

一个典型的人纽蛋白（VCL）ELISA试剂盒通常包含以下组分：

• 酶标包被板：96孔或48孔，预包被捕获抗体，需在2-8℃保存。
• 标准品：冻干粉或液体，用于绘制标准曲线，需梯度稀释。
• 酶标试剂：HRP标记的检测抗体，即用型。
• 显色剂A液/B液：TMB底物溶液，B液需避光保存。
• 终止液：浓硫酸溶液，具强腐蚀性。
• 浓缩洗涤液：20×或30×浓缩液，含吐温20，使用前需稀释。
• 样品稀释液：用于稀释血清、血浆等样本。
• 封板膜/自封袋：用于孵育密封及剩余板条保存。

四、适用样本类型

该试剂盒可用于定量检测多种类型的样本，包括但不限于：

• 血清：使用不含热原和内毒素的试管收集血液，室温静置凝固后，离心取上清。
• 血浆：可使用EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，采集后30分钟内离心取上清。
• 细胞培养上清：离心去除细胞碎片和聚合物后使用。
• 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水或PBS（pH 7.4）匀浆，离心后取上清。

五、性能指标

• 检测范围：因品牌和型号而异，一般在15.6-1000pg/ml或更高范围内。
• 灵敏度： 检测浓度通常小于10pg/ml，具体数值需参考产品说明书。
• 特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
• 重复性：板内变异系数小于10%，板间变异系数小于15%。