一、检测原理
人苹果酸脱氢酶1(MDH1)ELISA试剂盒通常采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。其检测原理为:往预先包被MDH1捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并洗涤后,用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的MDH1呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中MDH1的浓度。
二、产品组成
人苹果酸脱氢酶1(MDH1)ELISA试剂盒通常包含以下组分:
- 微孔酶标板:预先包被了能特异性识别人MDH1蛋白的抗体(捕获抗体)。
- 标准品:提供不同浓度的MDH1标准品,用于绘制标准曲线。
- 样本稀释液:用于稀释待测样本。
- 检测抗体-HRP:辣根过氧化物酶(HRP)标记的抗MDH1抗体。
- 洗涤缓冲液:用于洗涤微孔板,去除未结合的成分。
- 底物A和底物B:TMB显色液,用于显色反应。
- 终止液:用于终止显色反应。
- 封板膜:用于封住微孔板,防止液体蒸发。
- 说明书:提供详细的操作步骤和注意事项。
三、产品特点
- 高灵敏度:能够检测到低浓度的MDH1。
- 高特异性:不与其它可溶性结构类似物发生交叉反应。
- 重复性好:板内变异系数和板间变异系数均较小,保证实验结果的稳定性。
- 操作简便:提供详细的操作步骤和注意事项,方便用户使用。
四、使用方法
- 样本准备:收集血清、血浆、组织匀浆或细胞培养上清等生物样本,按照说明书要求进行处理和保存。
- 加样:设置标准品孔和样本孔,分别加入不同浓度的标准品和待测样本。
- 孵育:加入HRP标记的检测抗体,孵育一定时间使抗体与抗原结合。
- 洗涤:用洗涤缓冲液洗涤微孔板,去除未结合的成分。
- 显色:加入底物A和底物B,孵育一定时间使底物显色。
- 终止:加入终止液终止显色反应。
- 测定:用酶标仪在450nm波长下测定各孔的OD值。
- 计算:根据标准品的OD值和浓度绘制标准曲线,通过样本的OD值计算样本中MDH1的浓度。
