实验原理

• 采用间接竞争ELISA法，样本中GOS与预包被的偶联抗原竞争GOS抗体，形成包被抗原-抗体-酶标二抗复合物，通过酶催化底物显色，样本吸光值与GOS含量成负相关。

精密度

• 批内精密度：同批次试剂盒对高、中、低浓度样品重复测定20次，变异系数（CV%）<10%。
• 批间精密度：不同批次试剂盒对高、中、低浓度样品重复测定20次，变异系数（CV%）<15%。

试剂准备

• 标准品：系列浓度梯度稀释（如0、0.1、0.3、0.9、2.7、8.1 μg/mL）。
• 酶标记物：棉酚-HRP结合物。
• 底物溶液：TMB显色液（A液与B液1:1混合）。
• 终止液：2M硫酸溶液。
• 其他试剂：洗涤缓冲液、样本提取液、包被微孔板（预包被抗棉酚抗体）。

实验步骤

• 样本孵育：加入标准品/样品及抗试剂，37℃孵育30分钟，洗涤3次。
• 二抗孵育：加入酶标抗体工作液，37℃避光孵育30分钟，洗涤4次。
• 显色终止：加入底物溶液避光显色15分钟，加入终止液。
• 结果测定：酶标仪450nm波长测吸光值，计算样本浓度。

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