一、检测原理

• 试剂盒由预包被弓形虫Sag1重组抗原的酶标板、酶标记物及其他配套试剂组成。
• 实验时，在酶标板中加入对照血清和待检样本，经温育后，若样品中含有弓形虫抗体，则与酶标板上抗原结合。
• 洗涤除去未结合的其他成分后，加入酶标记物，与酶标板上抗原抗体复合物发生特异性结合。
• 再次洗涤除去未结合的酶标记物，加入TMB底物液，与酶反应形成蓝色产物，显色深浅与样品中的特异性抗体含量成正相关。
• 加入终止液终止反应后，产物变为黄色，用酶标仪在450nm波长测定各反应孔中的吸光值，即可知样品是否含有弓形虫抗体。

二、试剂盒组成

• 酶标板
• 酶标记物
• 阴性对照
• 阳性对照
• 样品稀释液
• 浓缩洗涤液
• 底物液A和底物液B
• 终止液
• 盖板膜
• 自封袋
• 说明书

三、储存条件及有效期

• 储存条件：2～8℃避光保存。
• 有效期：一般为12个月，但包被板开封后请于2～8℃避光保存，避免受潮，使用期限可能缩短至2个月。

四、操作步骤（示例）

1. 准备：将试剂盒置室温30分钟，恢复至室温。取所需用量酶标板条，设阴性/阳性对照各2孔，未用的板条尽快密封，2～8℃保存。
2. 加样：阴性、阳性对照孔分别加入阴、阳性对照100μl；样品孔每孔加入稀释后的样品100μl。
3. 温育：混匀，置37℃反应30分钟。
4. 洗涤：扣去孔内液体，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，重复洗涤5次，拍干。
5. 加酶标记物：每孔加酶标记物100μl（空白孔除外），置37℃反应30分钟。
6. 洗涤：同步骤4。
7. 加底物液：每孔依次加底物液A、底物液B各50μl，混匀，37℃避光反应10分钟。
8. 终止反应：每孔加终止液50μl，混匀。
9. 测定吸光值：用酶标仪在450nm波长测定各反应孔中的吸光值（A值），无参比波长用空白孔调零。