牛口蹄疫亚洲Ⅰ型抗体检测试剂盒(阻断法)
- 发布日期: 2026-04-24
- 更新日期: 2026-05-07
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牛口蹄疫亚洲Ⅰ型抗体检测试剂盒(阻断法)基于阻断酶联免疫法(ELISA)原理,通过抗原与抗体的特异性结合反应来检测样本中的口蹄疫亚洲Ⅰ型抗体。实验时,将稀释的样本与抗原液同时加入酶标板中孵育,样本中的抗体与酶标板上的抗体竞争抗原,阻断抗原与板的结合。经洗涤后,加入抗体工作液孵育,再加入酶标记物孵育, 加入底物液与酶反应形成蓝色产物。显色深浅与样品中的特异性抗体含量成负相关,加入终止液终止反应后,产物变为黄色。用酶标仪在450nm波长测定各反应孔中的吸光值,即可知样品是否含有口蹄疫亚洲Ⅰ型抗体。
试剂盒组成
- 酶标板
- 酶标记物
- 样品稀释液
- 浓缩洗涤液
- 底物液A
- 底物液B
- 阳性对照
- 阴性对照
储存条件及有效期
- 储存条件:2~8℃避光保存。
- 有效期:一般为12个月。包被板开封后请于2~8℃避光保存,避免受潮,使用期限为2个月。
操作步骤(示例)
- 准备:将试剂盒置室温30分钟,恢复至室温。取所需用量酶标板条,设阴性/阳性对照各2孔,未用的板条尽快密封,2~8℃保存。
- 加样:阴、阳性对照孔分别加入阴、阳性对照50μl,样品孔每孔先加入工作洗涤液25ul,再加入稀释后的样品25μl, 都加入抗原液50μl。
- 孵育:震荡混匀10秒,盖好盖板膜,置37℃避光反应30分钟。
- 洗涤:甩去孔内液体,每孔加350μl工作洗涤液,静置30秒后弃去,重复洗涤5次, 一次拍干。
- 加抗体工作液:每孔加抗体工作液50μl,盖好盖板膜,置37℃避光反应30分钟。
- 洗涤:同步骤4。
- 加酶标记物:每孔加酶标记物50μl,盖好盖板膜,置37℃避光反应30分钟。
- 洗涤:同步骤4。
- 加底物液:每孔依次加底物液A、底物液B各50μl,混匀,盖好盖板膜,置37℃避光反应15分钟。
- 终止反应:每孔加终止液50μl,混匀。
- 测定吸光值:于450nm(可用630nm作参比波长)测定各孔吸光值(A值)。
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