一、预期用途

• 用于检测羊血清中口蹄疫亚洲Ⅰ型抗体。
• 可用于口蹄疫亚洲Ⅰ型疫苗免疫效果评价。

二、检测原理

• 试剂盒由预包被口蹄疫亚洲Ⅰ型抗体的酶标板、抗体工作液、抗原液酶标记物及其他配套试剂组成。
• 应用阻断酶联免疫法（ELISA）原理检测羊血清样本中口蹄疫亚洲Ⅰ型抗体。
• 实验时，将稀释的样本与抗原液同时加入酶标板中孵育，样本中的抗体与酶标板上的抗体竞争抗原，阻断抗原与板的结合。
• 经洗涤后，再加抗体工作液孵育；经洗涤后加入酶标记物孵育；再经洗涤除去未结合的酶标记物。
• 在孔中加底物液，与酶反应形成蓝色产物，显色深浅与样品中的特异性抗体含量成负相关。
• 加入终止液终止反应后，产物变为黄色。
• 用酶标仪在450nm波长测定各反应孔中的吸光值，即可知样品是否含有口蹄疫亚洲Ⅰ型抗体。

三、试剂盒组成

• 酶标板
• 酶标记物
• 样品稀释液
• 浓缩洗涤液
• 底物液A
• 底物液B
• 阳性对照
• 阴性对照

四、储存条件及有效期

• 于2～8℃避光保存，有效期为12个月。
• 包被板开封后请于2～8℃避光保存，避免受潮，使用期限为2个月。

五、操作步骤（示例）

1. 编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照1孔。
2. 加样：分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50μl。加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl。
3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7. 温育：操作同步骤3。
8. 洗涤：操作同步骤5。
9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色。
10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。液后15分钟以内进行。