• 双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）
• 抗原-抗体特异性结合，通过酶催化底物显色反应定量检测酪蛋白浓度。

• 标准品：冻干品复溶后梯度稀释（如10,000 pg/mL至78 pg/mL）。
• 检测抗体：HRP标记的检测抗体，按1:100稀释后使用。
• 洗涤液：20×浓缩液用蒸馏水或去离子水30倍稀释。
• 底物液：TMB显色液（A液与B液1:1混合，避光保存）。
• 终止液：2M硫酸溶液。
• 其他试剂：样本稀释液、封板膜、自封袋等。

• 加样：标准品、样本及空白孔各加入50 μL。
• 孵育：37℃水浴锅或恒温箱温育60分钟。
• 洗板：洗涤液充分洗涤5次，拍干。
• 加酶标抗体：每孔加入HRP标记的检测抗体100 μL，37℃孵育30分钟。
• 洗板：同上。
• 显色：加入TMB底物液100 μL，37℃避光孵育15分钟。
• 终止：每孔加入终止液50 μL，15分钟内测定OD值（450 nm波长）。

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