一、产品信息

• 产品名称：猪衣原体IgG抗体检测试剂盒（酶联免疫法）
• 英文名称：Test Kit for Antibodies to Porcine Chlamydia Psittaci (ELISA)
• 包装规格：96T×1/盒、96T×2/盒等
• 预期用途：用于检测猪血清中鹦鹉热衣原体抗体，可作为感染猪的血清学诊断指标。猪衣原体病是由鹦鹉热衣原体（Chlamydia Psittaci, CP）引起的一种慢性接触性传染病，临床表现多样化，病理变化也较为复杂。

二、检测原理

本试剂盒采用酶联免疫法（ELISA）原理，由预包被鹦鹉热衣原体抗原的酶标板、酶标记物及其他配套试剂组成。实验时，在酶标板中加入对照血清和待检样本，经温育后，若样品中含有鹦鹉热衣原体抗体，则将与酶标板上抗原结合。经洗涤除去未结合的其他成分后，再加入酶标记物，与酶标板上抗原抗体复合物发生特异性结合。再经洗涤除去未结合的酶标记物，在孔中加TMB底物液，与酶反应形成蓝色产物，显色深浅与样品中的特异性抗体含量成正相关。加入终止液终止反应后，产物变为黄色。用酶标仪在450nm波长测定各反应孔中的吸光值，即可知样品是否含有猪鹦鹉热衣原体抗体。

三、试剂盒组成

• 酶标板
• 酶标记物
• 样品稀释液
• 浓缩洗涤液
• 底物液A
• 底物液B
• 终止液
• 阳性对照
• 阴性对照
• 盖板膜
• 自封袋
• 说明书

四、储存及有效期

• 储存条件：于2～8℃避光保存。
• 有效期：一般为12个月。包被板开封后请于2～8℃避光保存，避免受潮，使用期限为2个月。

五、适用仪器

• 含450nm、630nm波长的酶标仪
• 37℃恒温设备
• 可调微量移液器

六、样品准备

1. 血清制备：取动物全血按常规方法制备血清，要求血清清亮，无溶血、无污染。样品1周内可于2～8℃保存，长期需置-20℃保存。
2. 血清稀释：用样品稀释液将待检血清按100倍稀释（如2μl血清加入198μl样品稀释液中，混匀）。阴、阳性对照不用稀释。
3. 洗涤液稀释：浓缩洗涤液使用前应恢复至室温使沉淀溶解，然后用蒸馏水或去离子水作20倍稀释。

七、检验方法

1. 试剂盒恢复：使用前将试剂盒置室温30分钟，恢复至室温。
2. 加样：取所需用量酶标板条，设空白对照1孔、阴性/阳性对照各2孔，未用的板条尽快密封，2～8℃保存。空白对照孔加样品稀释液100μl；阴、阳性对照孔分别加入阴、阳性对照100μl；样品孔每孔加入稀释后的样品100μl。
3. 温育：混匀，置37℃反应30分钟。
4. 洗涤：扣去孔内液体，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，重复洗涤5次，拍干。
5. 加酶标记物：每孔加酶标记物50μl（空白孔除外）。置37℃反应30分钟。
6. 再次洗涤：同步骤4。
7. 加底物液：每孔依次加底物液A、底物液B各50μl，混匀，37℃避光反应10分钟。
8. 加终止液：每孔加终止液50μl，混匀。
9. 测定吸光值：用空白孔调零，于450nm（可用630nm作参比波长）测定各孔吸光值（A值）。

八、参考值

实验正常的情况下，阴性对照≤0.15，阳性对照≥0.5。

九、检验结果的解释

1. 临界值计算：C.O（临界值）=2.1×阴性对照孔均值（阴性对照孔均值低于0.08时以0.08计算）。
2. 结果判定：样品A值≥C.O为阳性；样品A值

十、注意事项

1. 实验操作：实验操作时需戴手套、穿工作衣，严格健全和执行消毒隔离制度，各种实验废弃物都应按传染物处理。
2. 终止液处理：终止液具有腐蚀性，应避免接触皮肤和衣物，如不慎接触请立即用大量自来水冲洗。
3. 酶标板处理：酶标板从冷藏环境中取出时应恢复至室温方可开袋，未用完的酶标板需放入有干燥剂的密封袋中保存。
4. 洗涤液处理：浓缩洗涤液在低温时容易结晶，使用时需恢复至室温以完全溶解。洗涤时各孔均需加满液体，防止孔口有游离酶不能洗净。
5. 样品新鲜度：用于检测的样品应保持新鲜。
6. 结果判定：试验结果的判定必须以酶标仪读数为准。
7. 试剂组分：不同批号试剂组分不得混用。